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制備供試液時應該考慮哪些問題?

作者:訪客發布時間:2021-09-06分類:催化劑及助劑瀏覽:75


導讀:??醫用玻璃容器不僅需要徹底消毒與滅菌處理,還需要徹底清除細菌內毒素。在內毒素檢測中,供試液制備質量是檢測成功的關鍵。衛生部先后對玻璃注射器和一次性注射器產品細菌內毒素檢測供試液制...

??醫用玻璃容器不僅需要徹底消毒與滅菌處理,還需要徹底清除細菌內毒素。在內毒素檢測中,供試液制備質量是檢測成功的關鍵。衛生部先后對玻璃注射器和一次性注射器產品細菌內毒素檢測供試液制備方法作出具體規定和要求,但前后兩種制備供試液的方法有差異,本實驗對兩種方法制備的供試液對細菌內毒素檢測結果的影響進行了比較。
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1、藥品微生物檢驗的特殊性

2、增修訂內容

1)明確規定了供試液制備時使用水浴加熱的溫度和加熱時間(溫度為不大于45攝氏度。

2)明確規定了供試液從制備完畢到加入培養基的時間應不超過1小時

3)對非水溶性供試品,增訂了使用十四烷酸異丙酯溶解供試液方法。
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4)刪除了2000版收載的所有稀釋劑,增訂了其他四種,分別為PH7。0無菌氯化鈉—蛋白胨緩沖液、0。9%無菌氯化鈉溶液和PH6。8無菌磷酸鹽緩沖液以及PH7。6無菌磷酸鹽緩沖鹽

3、非水溶性供試品制備方法

十四烷酸異丙酯法

適用范圍:用于一法不能溶解,可溶于十四烷酸異丙酯的膏劑和黏性油劑供試品

十四烷酸異丙酯的用量同方法驗證試驗(無菌十四烷酸異丙酯的制備采用薄膜過濾法過濾除菌,選用孔徑為0。
??22μm的脂溶性濾膜,在140度干熱滅菌2小時):無菌十四烷酸異丙酯,將購買的十四烷酸異丙酯用0。22

取供試品10g,加至含20ml 無菌十四烷酸異丙酯和無菌玻璃珠的適宜容器中,必要時可增加十四烷酸異丙酯的用量,充分振搖,使供試品溶解。
??然后加入45度PH7。0無菌氯化鈉—蛋白胨緩沖液100ml,振搖5~10min,萃取,靜置使油水明顯分層,取其水層為1:10的供試液

3、抑菌活性的供試品的拱試液制備方法。

1)、藥物的抑(抗)菌作用

2)抑菌性藥品檢查的理由A、可逆性B、抗菌譜C、細菌的耐藥性

3)抑菌藥物判定:A、已知B、驗證

5)制備方法

A、培養基稀釋法取規定量的供試液,至較大量的培養機中使各單位體積內的供試品含量減少至不含抑菌作用減少,由于化學抑菌劑的抑菌效果與其濃度呈相關,即濃度越高,抑菌作用越強。
??常用稀釋法中和檢品的抑菌性。不同抑菌性的濃度與其抑菌效力間的相關性不同,但對某一特定的抑菌劑來說,這種相關性是恒定不變的,二者呈指數關系,可用下式表示:

Gt=k

式中,C表示抑菌劑的濃度;t 表示殺滅標準試驗菌所需要的時間;k是一個常數;濃度指數η,是lgt與lgC做圖做得直線的斜率。
??抑菌劑的η值越高,其抑菌作用越易。通過稀釋而被中和掉,抑菌劑的η值越低則越難通過稀釋法來中和消除其抑菌力。

本法適用抑菌作用不強的各類中西藥制劑。

方法:取同稀釋級的供試液2ml,每1ml等量分注5個平皿,傾注培養基混勻,培養計數,分別計算5個平皿的平均菌落數,計算每1ml供試品的平均菌落數,按計數規則報告菌數。
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B、離心沉淀集菌法

1 ) 原理;利用質量和比量的不同

2)溶液劑及可溶于水的固體供試品:3000轉/分離心20分,棄上留底液2ml。

3)難容于水的固體供試品:500轉/分離心5分,棄上留底。

6)抑菌作用弱的固體供試品;也可一次低速離心取上層液直接入培養基。
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標簽:試液制備考慮


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