1.1 酸堿滴定法

1.1.1原理

于試樣中加入飽和氯化鈉溶液，在堿性條件下進(jìn)行萃取，分離出蛋白質(zhì)、脂肪等，然后酸化，用乙醚提取試樣中的苯甲酸，再將乙醚蒸去，溶于中性醚醇混合液中，最后以標(biāo)準(zhǔn)堿液滴定。

1.1.2儀器和試劑

(1)儀器

①堿式滴定管。 ②300ml燒杯。③250ml容量瓶。④500ml分液漏斗。⑤水浴箱。⑥吹風(fēng)機(jī)。⑦分析天平。⑧錐形瓶。

(2)試劑

①純乙醚：置乙醚于蒸餾瓶中，在水浴上蒸餾，收取35℃部分的餾液。②鹽酸(6mol/L)。

③氫氧化鈉溶液(100g/L)：準(zhǔn)確稱取氫氧化鈉100g于小燒杯中，先用少量蒸餾水溶解，再轉(zhuǎn)移至1000ml容量瓶中，定容至刻度。④氯化鈉飽和溶液。⑤純氯化鈉。⑥95％中性乙醇：于95％乙醇中加人數(shù)滴酚酞指示劑，以氫氧化鈉溶液中和至微紅色。⑦中性醇醚混合液：將乙醚與乙醇按1：1體積等量混合，以酚酞為指示劑，用氫氧化鈉中和至微紅色。⑧酚酞指示劑(1％乙醇溶液)：溶解1g酚酞于100ml中性乙醇中。⑨氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.05 mol/L)：稱取純氫氧化鈉約3g，加入少量蒸餾水溶去表面部分，棄去這部分溶液，隨即將剩余的氫氧化鈉(約2g)用經(jīng)過煮沸后冷卻的蒸餾水溶解并稀釋至1000 ml，按下法標(biāo)定其濃度。

1.1.3操作步驟

(1)樣品的處理

①固體或半固體樣品：稱取經(jīng)粉碎的樣品100g置250ml容量瓶中，加入300ml蒸餾水，加入分析純氯化鈉至不溶解為止(使其飽和)，然后用100g／L氫氧化鈉溶液使其成堿性(石蕊試紙?jiān)囼?yàn))，搖勻，再加飽和氯化鈉溶液至刻度，放置2h(要不斷振搖)，過濾，棄去最初l0ml濾液，收集濾液供測(cè)定用。

②含酒精的樣品：吸取250ml樣品，加入100g/L氫氧化鈉溶液使其成堿性，置水浴上蒸發(fā)至約100ml時(shí)，移入250ml容量瓶中，加入氯化鈉30g，振搖使其溶解，再加氯化鈉飽和溶液至刻度，搖勻，放置2h(要不斷振搖)，過濾，取濾液供測(cè)定用。

③含脂肪較多的樣品：經(jīng)上述方法制備后，于濾液中加入氫氧化鈉溶液使成堿性，加入20～50ml乙醚提取，振搖3min，靜置分層，溶液供測(cè)定用。

(2)提取

吸取以上制備的樣品濾液100ml，移入250 ml分液漏斗中，加6mol/L鹽酸至酸性(石蕊試紙?jiān)囼?yàn))。再加3ml鹽酸(6mol/L)，然后依次用40、30、30ml純乙醚，用旋轉(zhuǎn)方法小心提取。每次搖動(dòng)不少于5min。待靜置分層后，將提取液移至另一個(gè)250ml分液漏斗中(3次提取的乙醚層均放大這一分液漏斗中)。用蒸餾水洗滌乙醚提取液，每次10ml，直至最后的洗液不呈酸性(石蕊試紙?jiān)囼?yàn))為止。

將此乙醚提取液置于錐形瓶中，于40～45℃水浴上回收乙醚。待乙醚只剩下少量時(shí)，停止回收，以風(fēng)扇吹干剩余的乙醚。

(3)滴定

于提取液中加入30ml中性醇醚混合液，10ml蒸餾水，酚酞指示劑3滴，以0.05mol/L氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴至微紅色為止。

4)結(jié)果計(jì)算



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標(biāo)簽：苯甲酸產(chǎn)生食品