PCR混合體系建立的問題
作者:化工綜合網發布時間:2022-01-19分類:無機化工瀏覽:351
導讀:就是把buffer,primer,dntps,tag以及水按照比例放在一起,配成一個mix并且混勻,然后再按總量加入到每一個模板里,這樣可以保證每個模板的反應體系是一樣的,減少誤差...
就是把buffer,primer,dntps,tag以及水按照比例放在一起,配成一個mix并且混勻,然后再按總量加入到每一個模板里,這樣可以保證每個模板的反應體系是一樣的,減少誤差,并且簡化操作。
其間注意保持酶的活性,所以酶在最后加入,也就是你先加模板,在加mix里的其他東西,最后加酶混勻后再分別加到加有模板的pcr小管里。加了酶之后最好不要使用劇烈的vortex,用手指輕彈混勻。
配mix時記得多算量,比如你連模板帶對照是6管,一般配6.5或者7倍用量的mix,防止掛壁等問題使最后加的量不足。
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