請(qǐng)問淀粉在淀粉酶水解下的產(chǎn)物是什么?
作者:化工綜合網(wǎng)發(fā)布時(shí)間:2023-01-16分類:無(wú)機(jī)化工瀏覽:135
淀粉是多糖 麥芽糖是二糖 葡萄糖是單糖 這點(diǎn)知道吧 化學(xué)中的條件是酸性條件下的水解 得到的是最終產(chǎn)物——葡萄糖 生物里的條件是淀粉酶,分解成二糖——麥芽糖 而麥芽糖分解成葡萄糖需要的是麥芽糖酶 這里體現(xiàn)的是酶的專一性~一種酶只能促進(jìn)一種(或一類)反應(yīng)
設(shè)計(jì)一個(gè)從自然界篩選高溫淀粉酶產(chǎn)生菌的實(shí)驗(yàn)方案,并說(shuō)明主要步驟及其基本原理
C源用淀粉然后用高溫培養(yǎng)(不能讓淀粉糊化)
1.C源用淀粉選擇只能利用淀粉的微生物(其中就含淀粉酶)
2 高溫 選擇出能在高溫下利用淀粉的
簡(jiǎn)述如何篩選一個(gè)產(chǎn)淀粉酶效率比較高的菌株。
紫外線誘變選育α-淀粉酶高產(chǎn)菌株一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1. 學(xué)習(xí)菌種的物理因素誘變育種基本技術(shù)。 2. 通過誘變技術(shù)篩選出高產(chǎn)ɑ-淀粉酶的菌株。 二、實(shí)驗(yàn)原理 紫外線是一種最常用有效的物理誘變因素,其誘變效應(yīng)主要是由于它引起DNA結(jié)構(gòu)的改變而形成突變型。紫外線誘變一般采用15W或30W紫外線燈,照射距離為20~30 cm,照射時(shí)間依菌種而異,一般為1~3 min,死亡率控制在50%~80%為宜。被照射處理的細(xì)胞,必須呈均勻分散的單細(xì)胞懸浮液狀態(tài),以利于均勻接觸誘變劑,并可減少不純種的出現(xiàn)。同時(shí),對(duì)于細(xì)菌細(xì)胞的生理狀態(tài),要求培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期為最好。 本實(shí)驗(yàn)以紫外線處理產(chǎn)淀粉酶的枯草桿菌,通過透明圈法初篩,選擇淀粉酶活力高的生產(chǎn)菌株。 三、實(shí)驗(yàn)材料 ⑴ 菌種 產(chǎn)淀粉酶枯草芽孢桿菌 ⑵ 器材 裝有15W或30W紫外燈的超凈工作臺(tái)、電磁力攪拌器(含轉(zhuǎn)子)、低速離心機(jī)、培養(yǎng)皿、涂布器、10mL離心管、(1、5、10mL)吸管、250mL三角瓶、恒溫?fù)u床、培養(yǎng)箱、直尺、棉簽、橡皮手套、洗耳球 ⑶ 培養(yǎng)基和試劑 ① 無(wú)菌水、75%酒精 ② 0.5%碘液 碘片1g、碘化鉀2g、蒸餾水200mL。先將碘化鉀溶解在少量水中,再將碘片溶解在碘化鉀溶液中,待碘片全部溶解后,加足水即可。 ③ 選擇培養(yǎng)基 可溶性淀粉2g,牛肉膏1g,NaCl 0.5g,瓊脂2g,蒸餾水100mL,pH6.8~7.0,121℃滅菌20min。 ④ 肉湯培養(yǎng)基 牛肉膏0.5g,蛋白胨1g,NaCl 0.5g,蒸餾水100mL,pH7.2~7.4,121℃滅菌20min。 四、實(shí)驗(yàn)步驟 ⑴ 菌體培養(yǎng) 取枯草芽孢桿菌一環(huán)接種于盛有20 mL肉湯培養(yǎng)基的250mL三角瓶中,于37℃振蕩培養(yǎng)12h,即為對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的菌種。 ⑵ 菌懸液的制備 取5mL發(fā)酵液于10mL離心管中,以3000r/min離心10min,棄去上清液。加入無(wú)菌水9mL,振蕩洗滌,離心10min,棄去上清液。加入無(wú)菌水9mL,振蕩均勻。 ⑶ 誘變處理 將菌懸液傾于無(wú)菌培養(yǎng)皿中(內(nèi)放一個(gè)磁力攪拌棒),置電磁力攪拌器上于超凈工作臺(tái)紫外燈下(距離30cm)照射0.5~1min。 ⑷ 取0.1~0.2mL誘變后菌懸液于選擇培養(yǎng)基平板上,用涂布器涂勻。置37 ℃暗箱培養(yǎng)48h。 ⑸ 在長(zhǎng)出菌落的周圍滴加碘液,觀察并測(cè)定透明圈直徑(C)和菌落直徑(H),挑選C/H值最大者接入斜面保藏。 五、注意事項(xiàng) 1. 紫外線對(duì)人體的細(xì)胞,尤其是人的眼睛和皮膚有傷害,長(zhǎng)時(shí)間與紫外線接觸會(huì)造成灼傷。故操作時(shí)要戴防護(hù)眼鏡,操作盡量控制在防護(hù)罩內(nèi)。 2. 空氣在紫外燈照射下,會(huì)產(chǎn)生臭氧,臭氧也有殺菌作用。臭氧過高,會(huì)引起人不舒服,同時(shí)也會(huì)影響菌體的成活率。臭氧在空氣中的含量不能超過0.1%~1%。
標(biāo)簽:淀粉酶菌株簡(jiǎn)述淀粉酶生產(chǎn)
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