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離子交換層析中,為什么用氯離子洗脫陰離子?為什么改變氯離子濃度就可以分離出帶電荷不同的陰離子?
作者:訪客發(fā)布時間:2021-09-07分類:有機原料瀏覽:63
導(dǎo)讀:陰離子交換柱的填料是正電填料,在低鹽條件下可以通過電荷相互作用吸附樣品中的陰離子和負電荷物質(zhì)(如DNA)。這些帶負電的物質(zhì)由于其帶電量不同,分子大小不同,因而與正電填料之間的結(jié)合力...
陰離子交換柱的填料是正電填料,在低鹽條件下可以通過電荷相互作用吸附樣品中的陰離子和負電荷物質(zhì)(如DNA)。這些帶負電的物質(zhì)由于其帶電量不同,分子大小不同,因而與正電填料之間的結(jié)合力也就不同。用梯度的氯離子(一般用氯化鈉梯度,例如從100mM氯化鈉線性梯度升高到1M氯化鈉)洗脫掛柱樣品時,氯離子會和結(jié)合上的物質(zhì)競爭結(jié)合正電填料,伴隨著氯離子濃度的不斷升高,氯離子的競爭作用越來越強,與填料結(jié)合的物質(zhì)會按照親和力從弱到強依次洗脫下來,形成獨立的洗脫峰,從而將這些物質(zhì)分開。
陽離子交換柱與之正好相反,柱子填料為負電荷,用鈉離子洗脫結(jié)合的正電物質(zhì)。
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